商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號(hào) | E-XB6713 | 種屬 | 小鼠 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
商品詳情:
別稱 CT26WT
種屬 小鼠
年齡(性別) 不詳
組織來源 器官:結(jié)腸;品系:BALB/c;疾?。喊?/span>
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
背景描述 CT26細(xì)胞是以N-亞硝基-N-甲基氨基甲酸酯(NNMU)誘導(dǎo)形成的未分化結(jié)腸癌細(xì)胞株,它克隆形成的細(xì)胞株命名為CT26.WT。用包含編碼典型腫瘤相關(guān)抗原(TAA)β-半乳糖苷酶(β-gal)的lacZ基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CT26.WT細(xì)胞,得到致死的亞克隆CT26.CL25。即使CT26.CL25細(xì)胞表達(dá)了典型的TAA-β-半乳糖苷酶,在正常小鼠中CT26.CL25細(xì)胞和CT26.WT細(xì)胞的生長率與致死率也保持基本一致。CT26.WT細(xì)胞與CT26.CL25細(xì)胞一起可用作測試免疫治療程序的模型,并用于研究宿主免疫反應(yīng)。
生物安全等級(jí) 1
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, in BALB/c mice. Mice inoculated, subcutaneously, developed lethal tumors at 80% frequency with 1×10^3 cells and at 99% with 1×10^4 cells. Pulmonary metastases developed when mice were inoculated, intravenously, with 1×10^4 cells.
抗原表達(dá)情況 H-2d
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2638 BCRC; 60447

細(xì)胞系培養(yǎng)步驟:
細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?:
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?:
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細(xì)胞凍存?:
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展,為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?:
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?:
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存?:
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展,為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本
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細(xì)胞接收后的處理:
1)CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
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